最近更新：2022-02-05
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体外诊断试剂基因工程药物
生物药
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所学课程：1.利用PCR技术克隆漆酶与木聚糖酶基因，通过限制性内切酶和连接酶将PCR产物连接到真核表达载体中；利用反向PCR技术将漆酶基因与木聚糖酶基因中间加上linker，再次利 用反向PCR技术将构建好的两种载体的木聚糖酶基因后加上HIS标签；2..利用电转仪将构建好的两种真核表达载体转化到HIS缺陷型毕赤酵母GS115和毕赤酵母KM71中，利用真核表达载体上的抗生素抗性和目的基因与底物的显色作用通过筛选平板筛选阳性转化子；3..利用筛选平板上变色圈的大小初步确定阳性转化子的酶活大小，利用摇瓶培养进一步筛选高酶活转化子；4.将筛选出的高酶活转化子摇瓶培养，并通过温度，pH，转速，培养温度，Cu
所学课程：专业描述： 1.设计并参与分子生物学相关操作包括引物设计、基因克隆、载体构建、蛋白质电泳、Wb、转化和感受态的制备；PCR仪、荧光定量PCR仪、凝胶成像仪、超声破碎仪、电转仪、酶标仪的使用；2.参与大肠杆菌和毕赤酵母等常用原核和真核基因工程菌表达载体的构建；3.设计和优化大肠杆菌和毕赤酵母基因工程菌的发酵条件；4.利用NI柱、GST、离子交换柱分离纯化蛋白产品；5.菌种的筛选和保存；6.I-SceI法敲除大肠杆菌基因。
上海埃秀马生物科技有限公司|基因工程药物
工作描述：工作描述： 1.CAR-T细胞生产 ，sepax分离PBMC，G-REX培养CAR-T细胞2.GMP实验室日常维护3.实验数据收集，文件升版，变更和偏差处理
伽蓝（集团）股份有限公司|基因工程药物
工作描述：工作描述： 1.3D皮肤模型培养及石蜡切片鉴定皮肤模型结构 2.撰写专利3.成纤维细胞，角质细胞，黑素细胞原代提取4.2D细胞相关检测实验，包括细胞爬片免疫荧光法检测化妆品活性成分对细胞中透明质酸合成酶的影响；MTT实验检测细胞增值，细胞毒性；细胞划痕实验；角质细胞与黑素细胞共培养检测化妆品活性成分美白功效实验；CFE/CFU实验鉴定角质形成细胞，辐照成纤维细胞以及生长因子质量。5.细胞库维护。负责各类细胞存取管理，及时更新细胞库；负责三种皮肤细胞（角质细胞，黑素细胞，成纤维细胞）培养，冻存，复苏及细胞库扩增
上海葆年生物科技有限公司|基因工程药物
工作描述：工作描述： 1.CAR-T研发。利用in-fusion clone方法构建第三代anti-CD19 CAR 重组慢病毒载体，利用pMD2.G，psPAX2和backbone质粒通过293T细胞包装病毒，病毒浓缩，流式检测病毒滴度，利用anti-CD3/CD28 beads并结合IL-2，IL-15刺激T细胞增值，慢病毒感染T细胞，构建CD19-CAR T细胞；2.PBMC提取及增殖的优化，NK，CIK细胞培养；3.干细胞相关免疫试验，通过流式检测MSC对anti-CD3/CD28 beads及PHA刺激的PBMC增殖的抑制作用，磁珠分选CD4+T细胞，检测MSC对Treg的影响并建立检测实验SOP；4.建立干细胞质检相关实验SOP,包括PCR方法对MSC培养过程中支原体污染的检测，荧光定量PCR方法检测MSC端粒酶，Western blot方法对MSC多能性标志物Nanog，sox-2,oct3/4的检测，PCR方法检测MSC种间交叉污染。5.超速离心方法分离外泌体，利用Western blot 检测外泌体标志性markerCD63。
生工生物工程（上海）股份有限公司|体外诊断试剂
工作描述：工作描述： 1.构建载体pPIC9K-sap及pPIC9K-prok，在酵母中表达虾碱性磷酸酶（sap）及蛋白酶K(prok)；2.探索易错PCR突变条件，突变率达到91.4%；3.技术支持，对使用本部门产品（蛋白纯化类，蛋白提取类，蛋白定量类，蛋白标记类，SDS-PAGE,2D电泳,WB,IP相关产品等）的客户提供实验技术咨询服务，对外购及客户投诉产品进行质检。